Полимеразна верижна реакция (PCR) за туберкулоза

Туберкулозата е една от най-опасните болести, от които човечеството страда от стотици години. Въпреки че учените са успели да идентифицират причинителя и да измислят антибиотици, за да го отстранят, лечението не винаги е успешно. Основната причина е дълъг период на латентна или латентна форма на заболяването, която може да продължи няколко години. Късната диагноза значително намалява шансовете на пациента за възстановяване и пълноценен живот.

Какво е PCR?

За откриване на mycobacterium tuberculosis в организма повече от сто години успешно е използван теста Манту. Други методи са се доказали добре: бактериологична култура в изкуствена среда, микроскопия с намазка, ELISA. Въпреки това голям брой усложнения и фалшиво положителни резултати, както и продължителността на някои методи, изискват въвеждането на нови технологии в диагностичната методология. Голям пробив в областта на микробиологията е появата на PCR анализ за туберкулоза. В продължение на няколко десетилетия той показва своята ефективност и се използва широко за диференциалната диагностика на различни форми на туберкулоза.

PCR анализът за туберкулоза или полимеразна верижна реакция е метод за откриване на ДНК на бактерии или на техните фрагменти, който се основава на увеличаване на молекулите на нуклеиновите киселини под действието на ензимната ДНК полимераза. За положителен резултат е достатъчна само една молекула на патогенната ДНК, затова този метод се счита за силно чувствителен. Диагностиката на OCP при туберкулоза е по-ефективна от засяването на микобактериите в изкуствена среда, тъй като за разлика от метода на култивиране, тя позволява да се направи разлика между диви и ваксинирани щамове, ваксинирани с BCG. Това избягва фалшивите положителни резултати и прави диагнозата по-точна.

Ползи от PCR

PCR диагностика за туберкулоза прави възможно откриването на Koch bacillus във всяка биологична среда на организма с определяне на техния количествен състав дори в началния стадий на заболяването, когато микобактериите са в хибернация. Диагностика на заболяването в латентна фаза дава възможност да се започне профилактично лечение във времето, за да се предотврати развитието на огнища на възпаление в белите дробове и появата на усложнения в други органи и системи. Освен това, PCR тестът за туберкулоза има няколко предимства:

• висока специфичност - 90-100%;
• висока скорост - от 4 часа до 2 дни;
• висока чувствителност, особено при имунодефицит;
• диференциална диагноза.

Основното предимство на метода е, че диагностицирането на туберкулозата при децата позволява да се разграничи разпространената форма на заболяването от ограниченото фокално, дори и с отрицателни резултати от други изследвания. Диференциалното тестване ви позволява да изберете правилния режим на лечение и да повишите ефективността на терапията.

Високата специфичност на анализа се постига чрез елиминиране на кръстосани реакции с други молекули на нуклеинови киселини, а високата чувствителност прави възможно откриването на микобактерии дори в малък обем от събрания материал. PCR методът на храчки за туберкулоза има най-голяма надеждност, неговата специфичност достига 100% в сравнение с изследването на други биологични материали.

Специален механизъм на PCR осигурява широки възможности за откриване на кочовите пръчки при имунокомпрометирани пациенти. Според метода на анализ, реакцията открива антигени, така че няма значение дали тялото произвежда антитела към патогена, или не. По този начин е възможно да се диагностицират екстрапулмонални форми на заболяването и напреднали случаи при пациенти с неточности в имунната система, което не е възможно при използване на други методи.

Недостатъци на метода

Въпреки многото предимства и висока чувствителност на анализа, PCR за туберкулоза може да даде фалшиво отрицателен резултат. Тъй като много малко количество биоматериал се взема за диагностициране, фактът, че патогенът “се крие” в клетка или възпалителен фокус, не се изключва и не се освобождава отвън.

Чувствителността на този метод при деца е 25-80%. Например, в рандомизирано проучване в група от пациенти с клинично доказана диагноза, PCR кръвен тест за туберкулоза дава положителен резултат само при 50% от пациентите. Във връзка с това, при изпитване на дете за патогенни микобактерии, не е възможно да се замени един диагностичен метод с друг. За да се провери напълно липсата на инфекция, е необходимо едновременно да се извърши цялостно проучване по няколко начина.

Процес на събиране

Основно условие за надеждността на PCR диагностиката е спазването на правилата за събиране на биологични течности за анализ. Замърсеният или неправилно събран материал може да доведе до неправилни резултати. Най-често срещаните са анализът на храчки, кръв и урина, но за по-дълбока диференциална диагноза можете да вземете проби от съдържанието на стомаха, синовиалната течност, гръбначно-мозъчната течност, бронхиалната течност, спермата, секрецията на простатата.

PCR за урината за туберкулоза се приема сутрин след външна генитална хигиена чрез уриниране в стерилен контейнер. По време на процедурата е важно да не се докосват вътрешните стени на контейнера, за да се предотврати проникването на микроорганизми от трети страни. Жените, които живеят редовен сексуален живот, определено трябва да поставят тампон във вагината, за да се избегне освобождаване от трети страни.

Кръвен тест се прави сутрин на празен стомах, а PCR на храчки за туберкулоза може да се направи по всяко време на деня със задължителна предварителна хигиена на устната кухина. Това е необходимо за отстраняване на остатъци от храни, които могат да влязат в контейнера. При отхрачване на храчки е важно да се предотврати проникването на слюнка и слуз от назофаринкса в контейнера, което може да наруши данните от анализа.

Проучването на съдържанието на стомаха се извършва в болницата рано сутрин, докато слюнката се поглъща през нощта в стомаха. За да се открие микобактерията туберкулоза, този метод прави трикратно засяване, което най-вероятно позволява да се изолира Koch bacillus.

Резултати от декодирането

Качественият анализ на PCR дава 2 вида резултати "открити" или "неоткрити". Те означават положителна и отрицателна присъда, съответно. Отговорът "открито" означава, че ДНК на инфекциозния агент присъства в тестовата проба и с 97% вероятност тялото е заразено с туберкулоза. Отрицателният резултат показва липсата на ДНК на Кох в проба от биологичен материал и дава 97% вероятност, че тялото няма голям брой микобактерии и 60%, че лицето не е заразено.

Най-голямата специфичност за диагностицирането на туберкулозата е кръвна проба и храчки. С положителен резултат те показват инфекция на тялото, която изисква спешни терапевтични мерки. Изследванията на други биоматериали могат да показват не хода на заболяването, а само наличието на чужди бактерии. Това се случва, когато човек е носител на болестта, но не разпространява инфекцията в околната среда и не заразява здрави хора.

Количественият PCR анализ се извършва по-рядко и лекуващият лекар се занимава с декодиране на резултатите. Изследователските показатели се използват за определяне активността на заболяването и степента на увреждане на организма. Въз основа на получените данни специалистът може да определи ефективността на лечението и ако е необходимо, да коригира терапевтичната схема.

Туберкулозата винаги е била и остава един от най-сериозните проблеми за здравето на цялото човечество. Съвременните диагностични методи могат да открият болестта на ранен етап, за да започнат лечението навреме. Туберкулиновият тест, микроскопия с намазка, култура на бактерии върху изкуствени хранителни среди се доказаха в областта на лабораторната диагностика на туберкулозата. Дългото изчакване за резултатите и увеличената честота на фалшиво положителни четения ги оставиха остарели и извадиха на преден план по-напредналите технологии. PCR анализът е високо специфичен и високо ефективен метод за диагностициране на туберкулоза. Неговите резултати са най-надеждни сред всички предложени лабораторни методи за откриване на кочовите пръчки. Тя позволява не само да се направи окончателната присъда, но и да се проведе необходимата диференциална диагноза.

PCR диагностика на туберкулоза при деца и възрастни: показания за

Преди 20 години Световната здравна организация призна, че степента на разпространение на туберкулозата е извън контрол и е достигнала мащаба на епидемия. Оттогава ситуацията не се е подобрила. Всяка година се диагностицират повече от един милион случая на болестта, от които почти една четвърт са фатални. През последното десетилетие заболеваемостта сред децата се е повишила, повечето форми на заболяването не се поддават на стандартна антибиотична терапия.

Днес една от глобалните задачи на медицината е разработването на такива диагностични методи, които ще позволят да се идентифицира патологията преди началото на изразени клинични симптоми. Една от тях е полимеразната верижна реакция (PCR) за туберкулоза, която помага за откриване на причиняващите болестните коки пръчки в кръвта, храчките и други биологични течности.

Диагностика на туберкулоза

Скрининговите тестове са насочени към откриване на пациенти, носители на туберкулоза и предотвратяване на разпространението на инфекцията в обществото. За деца под 14-годишна възраст се използва мантовият тест. Това е имунологичен тест, при който се инжектира подкожно доза туберкулин - сложна смес от генетичния материал на няколко вида микобактерии. Появата на силно изразена реакция показва активно протичащ инфекциозен процес.

За профилактичен преглед при възрастни, използващи флуорография или рентгенови лъчи. Тези методи помагат да се визуализират патологични лезии в белодробната тъкан. Това обаче създава трудности при диференцирането на туберкулозата от друга органична патология (злокачествени и доброкачествени новообразувания, възпалителни процеси, паразитни инвазии, професионално увреждане на белите дробове).

За да се изясни структурата и размера на патологичния фокус, може да са необходими допълнителни инструментални изследвания:

• целенасочена радиография;
• компютърна томография;
• магнитен резонанс.

Методи за диагностициране на туберкулоза

В случай на съмнителни резултати и за назначаване на адекватна терапия, има нужда от по-точни диагностични методи, които позволяват да се изолира патогенът. Микроскопското и бактериологичното изследване на храчките се използва за дълго време за потвърждаване на белодробните форми на туберкулоза.

През последните години честотата на микобактериите на различни органи и системи - бъбреците, костите, червата, кожата - става все по-честа. За идентифициране на тези форми на туберкулоза, ултразвукови изследвания, култура на урина и фекалии, могат да се използват ендоскопски изследвания.

PCR диагностика за туберкулоза ще помогне да се потвърди наличието на кочовите пръчки в кръвта, както и неговата чувствителност към определени лекарства. Това е високо ефективен метод, основан на откриването на бактериален генетичен материал в различни биологични течности.

Специфичност и показания

Полимеразната верижна реакция е високочувствителен микробиологичен диагностичен метод, който се основава на принципите на генното инженерство. За да се потвърди наличието на патоген в биологичен материал, достатъчно е да се открие уникален фрагмент от нуклеинова киселина за него. PCR за туберкулоза може да открие бактерии в кръвта, слюнката, урината.

В момента са разработени няколко метода за анализ. Най-популярни сред тях са следните:

• PCR в реално време;
• микрофлуидна технология;
• последователност и пиросеквениране.

PCR в реално време

Лабораториите най-често използват полимеразно-верижна реакция в реално време, тъй като намалява броя на фалшиво-положителните резултати, а самият процес на анализ отнема кратко време.

Предвид големия брой скрити форми на заболяването и неефективността на стандартните диагностични методи, PCR се използва все повече. Целта на този анализ е показана на:

• идентифициране на подозрителни зони на рентгеновия лъч;
• съмнителни резултати от туберкулинов тест;
• невъзможността за провеждане на микроскопски и бактериологичен анализ на храчки при лица в тежко състояние;
• провеждане на хирургични интервенции, когато е необходимо бързо да се гарантира, че няма инфекция;
• недопустимост на използването на флуорография, рентгенови лъчи или компютърна томография (например при бременни жени и кърмене в случаи на свръх радиационна експозиция);
• съмнение за извънбелодробна туберкулоза (препоръчва се да се използва не само кръв, но и храчки).

PCR диагностиката на туберкулозата се е доказала при изследването на деца, поради липсата на допълнителна експозиция и бързи резултати.

Процедура за подготовка и анализ

Не се изисква специален препарат за кръвна PCR. Въпреки това, за да се избегнат усложнения при вземането на кръвни проби и за да се получи висококачествен материал, трябва да се следват следните общи правила:

• анализът трябва да се прави сутрин не по-рано от 2 часа след събуждане;
• Трябва да ограничи приема на мазнини и пържени храни на ден преди вземането на кръв;
• да се въздържат от ядене, чай и кафе в продължение на 8-9 часа, да се пие чиста вода;
• Не пушете в продължение на поне 3-4 часа.

В случай на постоянни медикаменти (хормони, антикоагуланти, противовъзпалителни средства, антибиотици, разредители за кръв), трябва да уведомите лаборанта за това.

При доставка на храчки трябва добре да миете зъбите си и да изплаквате устата си няколко пъти. Събирайте материал в стерилен контейнер. За по-добри резултати може да се вземе отхрачващо или муколитично средство вечер.

Самата диагноза се състои от няколко етапа.

Ограден материал. Тя може да се извърши в лаборатория и дистанционно. Някои видове материал, който пациентът събира самостоятелно (урина, храчки).

Разрушаването на структурата на нуклеиновите киселини (денатурация на молекули ДНК и РНК). За тази цел тестовият материал се загрява до температура от 98 градуса и се държи в продължение на няколко минути. В резултат на това двойната спирала се разтваря, образуват се едноверижни молекули.

Шега. След добавяне на грунд (кратък участък от нуклеинова киселина), температурата намалява с няколко градуса, активира се полимеразата.

Elognatsiya. Температурата се довежда до оптимално ниво, ензимната активност достига максимум и втората верига завършва в съответствие с Chargaff правилото за комплементарност.

За завършване на изследването е необходимо да се синтезира необходимия брой ДНК молекули - около 50 цикъла на горната реакция. Отнема около 2-3 часа. Положителният резултат от реакцията не винаги показва активния стадий на заболяването, но е индикатор за наличието на микроорганизъм в организма.

Предимства и недостатъци на метода

В сравнение с други микробиологични методи, PCR не отнема много време за откриване на Mycobacterium tuberculosis с помощта на PCR, резултатът може да бъде получен в деня на изследването.

Друго предимство е високата специфичност на анализа, която дава възможност да се открие наличието на патогена с точност 90-95% в почти всеки биоматериал (кръв, урина, фекалии, гръбначно-мозъчна течност, слюнка, зачервяване на бронхи).

Въпреки това, съществуват няколко недостатъка на метода:

• доста висок процент на фалшиво положителни резултати (до 15%), което е свързано с откриването на неживи микроорганизми;
• в някои случаи можете да пропуснете факта на заболяването, тъй като Mycobacterium tuberculosis често е подложен на мутации и промени в неговия генетичен материал;
• ниска ефективност при изследване на хора с имунен дефицит;
• високи разходи за изследвания, необходимостта от скъпо оборудване и реактиви.

Какво може да бъде заменено?

Предвид разнообразието от форми на туберкулозна инфекция, за по-точна диагноза и избор на лечение е необходимо да се комбинират няколко диагностични изследвания:

Задължителният анализ за децата е тестът на Манту. Ако въвеждането на туберкулин (генетичен материал от микобактерии) се прояви явно реакция, може да се предположи, инфекция с туберкулозен бацил.

Рентгенови методи могат да се използват за визуализиране на патологичния фокус. При диагностицирането на екстрапулмонална туберкулоза се използват ендоскопски методи с едновременна биопсия:

• бронхоскопия помага да се идентифицират лезии на ларинкса, трахеята, бронхите;
• колоноскопия - черва;
• цистоуретроскопия - органи на отделителната система;
• хистероскопия - женски полови органи. Тези методи не са специфични, за да се направи точна диагноза, патогенът трябва да бъде идентифициран.

Общите клинични тестове ще помогнат за по-конкретно определяне на състоянието на организма. Необходима е пълна кръвна картина с левкоцитна формула.

Увеличаването на броя на неутрофилите с понижено ниво на лимфоцити и увеличаване на скоростта на утаяване на еритроцитите (ESR) показва активен възпалителен процес на бактериална етиология. Да се ​​изключи увреждане на органите на отделителната система, като се използва общ анализ на урината и култура за стерилност.

Понастоящем PCR се предлага в повечето частни лаборатории. Това изисква не само висококвалифицирани специалисти, но и скъпо оборудване, голям брой реактиви. Следователно използването на този метод е ограничено, въпреки високата му точност и специфичност.

PCR анализ за диагностициране на туберкулоза

Медицината никога не стои неподвижно и досега напредъкът в сектора на здравеопазването дава възможност за диагностициране и излекуване на много от предишните незасегнати заболявания. Има и болести, които не могат да бъдат открити чрез визуална инспекция. Туберкулозата винаги е била сред тях. Това е опасна инфекциозна болест, която засяга белите дробове, ставите и костите и често води до смърт дори и в наши дни. Диагностичните методи за това заболяване са подобрени, което прави възможно откриването на заболяването на по-ранни етапи, когато е лечимо. Сред тях са не само рентгенови и мантови тестове, но и PCR за туберкулоза.

Туберкулоза - какво е това

Преди това туберкулозата се наричаше сухо заболяване или фтиза. Това е бактериална инфекция, която най-често засяга белите дробове. Неговите екстрапулмонарни форми - туберкулоза на костите и ставите, туберкулозен менингит - са по-чести и по-напреднали. За причинителя на това инфекциозно заболяване са микобактериите. Бацилът на туберкулозата се нарича също и пръчицата на Кох.

Инфекцията с туберкулоза е много заразна, тя се предава от въздушни капчици при кашляне и кихане на пациента. Единствената защита срещу тази болест е навременната доставена ваксина. Той не предпазва от инфекции, но не позволява на бацилите да проникнат в организма, за да причинят туберкулоза.

Форми на туберкулоза

Заболяването може да се прояви както в отворена, така и в затворена форма. Разликите са както следва:

• затворена туберкулоза е асимптоматична. При такива обстоятелства, кочовата палка в храчките е невъзможно да се открие, следователно инфектираният не е опасен за околната среда. Подобен ход на заболяването обикновено не застрашава най-заразените, но има и изключения - в един от десет случая затворената туберкулоза е в състояние да отиде в отворена форма;
• с отворена форма, микобактериите, които причиняват туберкулоза, се откриват в слюнката и храчките на пациента. Заразеният организъм представлява голяма опасност за обществото, дори в изолация. Като правило болестта първо засяга белите дробове. Ако не се диагностицира рано, тя може да приеме други форми, като туберкулоза на костите или ставите.

Отворената форма на туберкулоза се диагностицира по различни начини. Пациентът претърпява рентгенова снимка на гръдния кош или рентгенова снимка на гръдния кош, анализи на биологичния му материал или кожен тест на Манту. Неотдавна се появи друг метод, който се счита за еднакво ефективен - анализът на полимеразната верижна реакция (PCR).

Какво означава PCR?

В медицинската практика отдавна са използвани методи за диагностициране на това или онова заболяване чрез откриване на ДНК или РНК в човешкото тяло. Това е именно PCR за туберкулоза. Това е високо прецизен анализ на кръв или друга биологична течност, която ви позволява да идентифицирате бактерии с минимална концентрация в избрания материал, достатъчно е една клетка. Изследването се провежда с помощта на специален полимеразен ензим.

Предимства на метода

PCR е диагностичен метод, който се проявява от най-добрата страна, така че се използва доста често, както в комбинация с други методи, така и независимо. Неговите предимства:

• най-кратките срокове на производство. Изследването се провежда бързо, след около 5 часа чрез PCR може да се открие наличието на туберкулозен бацил в биологичната течност на пациента. Това е особено вярно, ако трябва да извършите незабавна хирургична интервенция и преди това да получите точна диагноза;
• Случва се, че други диагностични методи са противопоказани на пациента. Например рентгеновите лъчи не могат да се правят в никакъв случай. Освен това картината не винаги е възможно да се постави диагноза, особено ако заболяването е на ранен етап. С помощта на PCR метода, патогенът се открива незабавно;
• Биологичната течност на всеки пациент е подходяща за анализ. PCR на урината и слюнката за туберкулоза се извършва за идентифициране на белодробни и екстрапулмонални форми. Изследването се провежда и с помощта на гръбначномозъчната течност на пациента за откриване на туберкулозен менингит.
• Методът е абсолютно безопасен. За да го проведе, е достатъчно да се получи биологична течност от пациента. PCR диагностиката на туберкулозата при деца е удобна и безвредна, тъй като рентгеновото изследване е разрешено само на 18-годишна възраст, а тестът на Манту понякога причинява нежелани реакции;
• PCR е високо чувствителен анализ. Позволява ви да идентифицирате коковите пръчки с минимална концентрация на микобактерии;
• С помощта на специален полимеразен ензим, болестта се диагностицира на всеки етап, от ранна до напреднала;
• този метод е ефективен при диагностициране на рецидив на заболяването;
• Този метод е пробив в правенето на точни диагнози в ранните стадии на заболяването. Това ви позволява да започнете лечение в най-кратки срокове и да унищожите патогените, когато те все още не са имали необратимо отрицателно въздействие върху органите и системите на човешкото тяло.

Къде да се направи PCR анализ за туберкулоза

Въпреки че PCR анализът за туберкулоза е високо ефективен метод за диагностициране на това заболяване, той рядко се използва самостоятелно. По правило това е допълнителен метод за откриване на туберкулоза и се използва рядко. Факт е, че този метод е доста скъп.

Обществените клиники нямат възможност да закупят специално оборудване за извършване на PCR анализ, а правителството не вижда смисъл в финансирането на тази статия, тъй като туберкулозата може да бъде диагностицирана по други начини. Такова проучване най-често се извършва в частни клиники, които могат да си позволят закупуване на необходимото оборудване.

Недостатъци на метода

Високата цена не е единственият недостатък на PCR. В допълнение към високата цена, методът има и други недостатъци и недостатъци, например:

• PCR за туберкулоза дава положителен резултат дори след лечение, тъй като отнема мъртвите клетки като живи бактерии, следователно този метод не е подходящ като контролен преглед на пациента, за да потвърди възстановяването му;
• туберкулозните бацили мутират и тяхната ДНК се модифицира, което може да повлияе на надеждността на резултата;
• РЛР кръвни тестове за туберкулоза рядко се извършват, тъй като присъствието на пръчки Koch в тези биологични течности е изключително трудно за откриване. Това е възможно само в последните етапи или при сепсис. Обикновено храчките на пациента се вземат за диагностика;

Заслужава да се отбележи, че най-точният резултат е именно събирането на съдържанието на стомаха на пациента. Ако се подозира белодробна туберкулоза, културата на храчки ще бъде най-ефективният начин за диагностициране на заболяването. Ако пациентът има екстрапулмонална форма, тогава може да няма бактерии в тази биологична среда. За да се определи туберкулозата на костите, ставите и т.н. с помощта на PCR, е необходима друга биологична течност, например спинална течност.

Как е PCR за туберкулоза

Както е описано по-рано, същността на PCR анализа е да се открие ДНК на патогена в биологичната течност на пациента чрез полимеразната реакция. Основните етапи на метода:

1. Вземане на проби от биологичен материал. PCR не е само хемотест - изследваната биомаса може да бъде слюнка, урина, цереброспинална течност, бронхиална промивна течност, стомашно съдържание, храчки.
2. След това биомасата е изложена на високи температури, за да унищожи ДНК структурата на патогена.
3. След това температурата постепенно намалява и праймерът се прикрепя към унищожения ДНК елемент.
4. Според резултатите от молекулярния синтез, който отнема около 30 цикъла, се открива щамът на дадена патогенна бактерия или неговото отсъствие.

Този анализ изисква добро финансиране, така че PCR не се извършва много често. Въпреки това, този метод няма равни, когато други диагностични опции са забранени, или в случай на извънредна ситуация, когато няма време да се изчака резултатът.

Обобщава

В заключение можем да направим следните заключения:

• PCR е високо точен анализ, който може да открие туберкулоза няколко дни след инфекцията;
• този анализ се извършва за 3.5 - 5 часа, така че в случаите, когато сметката върви към часовника, тя е незаменима;
• това е безопасен метод, който няма странични ефекти;
• Използва се, когато други диагностични методи са показали противоречиви резултати или употребата им е противопоказана.

Въпреки това, PCR рядко се прави, тъй като това е скъп анализ, който изисква инсталирането на специално оборудване. Освен това той не винаги е информативен, така че експертите използват този метод за откриване на туберкулоза като допълнителен.

PCR анализ (диагностика) на туберкулоза

Туберкулоза или консумация - една от най-популярните инфекциозни заболявания на 21-ви век. Нейните патогени са специални микробактерии - кочови пръчки.

Заболяването се разпространява не само в белите дробове, но и в мозъка, храносмилането, ставите или гръбначния стълб, пикочната система и кожата.

Според СЗО 10 милиона души страдат от туберкулоза всяка година, от които 3 милиона са фатални.

Ситуацията е особено тъжна на територията на страните от ОНД, тук туберкулозната епидемия се среща периодично. Русия, Казахстан, Украйна се ръководят от тъжен рейтинг за разпространението на тази инфекция.

Инфекцията лесно се предава чрез въздушни капчици или чрез храносмилателната система, засяга жизненоважни органи и също така е в състояние бързо да се адаптира към полимерни лекарства и химиотерапия.

Един от основните фактори за успешното лечение на туберкулозата е своевременното откриване на инфекцията.

Диагностични методи

Човечеството е изобретил много методи за разпознаване на опасна болест. Диагностиката на туберкулозата е разделена на инструментална и лабораторна.

В първия случай, кръвен тест за туберкулоза, както и слюнка, урина.

Втората група е изследване с рентгенова и ендоскопия. Инструменталните методи за диагностициране на туберкулоза от своя страна са радиационни и хирургически.

Видове радиационни методи за откриване на болестта

• Флуорографията е метод за диагностициране на заболяване, познато на всеки жител на ОНД. С помощта на рентгенови лъчи се изследват белите дробове и лимфните възли.
• Рентгенография на гръдния кош - подобна на флуорографията, но по-добър метод за откриване на инфекция. Картината е получена по-подробно и в две прогнози, но тази процедура е около шест пъти по-скъпа. Обикновено се използва след сериозни подозрения за заболяването.
• Компютърната томография се извършва като допълнителна диагноза, която се използва и след основателна причина за наличие на инфекция.

Хирургичните методи за диагностика включват бронхиална ендоскопия, както и медиастиноскопия и торакокоскопия.

Първият метод е да се изследва бронхиалното дърво на белите дробове с помощта на „сонда” в този орган. Останалите два метода дават възможност да се изследва плевралната част на белия дроб чрез пункция на гърдите.

И трите метода са сериозна хирургична намеса и се използват най-често в процеса на прогресиране на заболяването.

Лабораторните тестове включват:

• Анализ на храчки за бацила на туберкула.
• Микроскопско изследване.
• PCR диагностика на туберкулоза

Какво е PCR диагноза?

Един от най-модерните методи за лабораторна диагностика на инфекции специалисти наричат ​​полимеразна верижна реакция.

Този метод е разработен от известния американски учен Кари Мулис през 1983 г., за което той е носител на Нобелова награда.

PCR анализът е изолиране на ДНК частици от храчки, кръв, гръбначномозъчна течност, изпражнения и др. за тяхната последваща биосинтеза.

С помощта на комплексно молекулярно генетично изследване се определя естеството на микробите в тялото на пациента.

Този вид анализ за туберкулоза се извършва на няколко етапа:

• Първо се вземат биологични проби. Материалите се поставят в специални контейнери и се изпращат в лабораторията.
• В изследователския център анализите се загряват до 97 градуса. Това позволява да се разруши структурата на генома на ДНК на микроорганизми, която се състои от няколко вериги.
• Температурата е специфично понижена, така че праймерите (участници в ДНК, от които започва процесът на биосинтеза) могат да се свържат към всяка верига на дезоксирибонуклеинова киселина.
• След това се извършва биосинтезата на молекули, необходими за откриване.

След 25-30 повтарящи се цикъла в лабораторните изследвания лекарите имат възможност да разберат дали инфекциозните микроорганизми присъстват в тялото на пациента или не.

Предимства и недостатъци

PCR за туберкулоза е най-модерната диагностична техника. Методът позволява откриването на инфекцията на всеки етап с висока надеждност. предимства:

• Скорост - изследването отнема не повече от пет часа. Резултатите от теста за туберкулозни микроби могат да бъдат намерени в рамките на 24 часа.
• Безопасност - PCR методът няма възрастови противопоказания.
• Навременност - тази техника ви позволява да откривате туберкулоза в тези стадии, когато болестта няма симптоми.
• Висока степен на точност - ако в анализите има само няколко микроорганизма, те ще бъдат намерени чрез полимеразна верижна реакция. Също така, тази техника прави възможно лесното идентифициране на причинителя на туберкулоза.
• Универсалност - диагностиката се използва не само за откриване на консумация, но и за други заболявания като хламидия, гонорея и др.

Въпреки многото предимства, използването на тази техника във вътрешната медицинска практика е по-скоро изключение, отколкото правило. Има няколко причини за това.

Недостатъците на този метод са:

• Високата цена на проучването.
• Методът не е подходящ за тези, които са преминали терапия, тъй като наличието на мъртви бактерии Кох може да доведе до фалшиво-положителен резултат.
• В случай на мутация на инфекциозни микроорганизми, техният геном не може да бъде разпознат чрез погрешно заключение.
• Важно е да изберете правилната среда за откриване. Например, резултатът от кръвен тест за PCR за туберкулоза (разреждане) ще бъде отрицателен, ако нервната система е заразена.
• Не винаги е възможно този метод да се приложи при пациенти с диагноза белодробни лезии.

В допълнение, такъв анализ за туберкулоза изисква модерно оборудване, което 90% от болниците нямат. В ОНД такъв анализ може да се извърши от мрежата на клиники Invitro

Условия за анализ

Препоръки за пациенти, подложени на такъв тест за туберкулоза, варират в зависимост от вида на анализите, които преминават.

Когато вземате кръв за PCR, е необходимо да се въздържате от пушене един час преди процедурата, за двама да спрете приема на алкохолни напитки и мастни храни.

Препоръчително е също така да се въздържат от физическо натоварване, също така е невъзможно да се вземе кръв за туберкулоза на празен стомах.

Когато вземате тампон от устата и носната кухина, не можете да ядете 2-4 часа преди процедурата, в противен случай няма да е информативен. Също така, не пийте алкохол.

За прецизното отчитане е забранено пушенето по-рано от час преди процедурата. В навечерието се въздържайте от миене на зъбите и използване на спрейове и спрейове за устата.

Ако подозирате туберкулоза на урогениталната система, пациентът за 2-3 дни преди раждането трябва да изключи секса, за 2-3 часа преди процедурата, да не отидете в тоалетната “по малък начин”. Гениталните органи трябва да се мият с обикновена вода без специални средства.

На жените се препоръчва да не използват вагинални таблетки, свещи, топки и да се въздържат от тестове в критични дни.

5 дни преди раждането, резултатът е необходим, за да се откаже от процедурата на колпоскопия, както и от трансвагинален ултразвук,

Кога се използва PCR диагностика?

Не всяка клиника има такава сложна диагноза, но лекарите все повече прибягват до такива методи на изследване. Обикновено този вид анализ се извършва в специални ситуации.

• В случай на съмнителни резултати от манта може да се използва кръвен тест за туберкулоза.
• В случаите, когато пациентът е бил в контакт със заразено лице, но лекуващият лекар не може точно да определи диагнозата.
• В случай на спешна операция, когато е необходимо да се установи за кратко време дали пациентът има тази инфекция.
• Когато пациентът е бременна, когато други методи на изследване не са достатъчно безопасни за новородено бебе.

Трябва да се отбележи, че тази диагноза се препоръчва на децата поради нейната безопасност.

Ако студентът има противопоказания срещу туберкулинов тест, той може да вземе кръвен тест за туберкулоза вместо мантия чрез PCR.

PCR анализ за туберкулоза

PCR анализът за туберкулоза е най-популярен сред медицинските изследвания в областта на това заболяване.

Но как да предупредим себе си и близките си от тази ужасна болест? Как да преминат необходимите тестове за PCR?

Симптомите на туберкулоза и нейната профилактика

Според експерти около 30% от общото население страда от туберкулоза.

Най-висок процент от заболяването се развива в неразвитите страни. Това най-често се случва в резултат на намален имунитет при хората.

Заболяването е едно от най-старите. Това заболяване може да се намери в лигавицата на мозъка, в храносмилателния тракт, в ставите и гръбначния стълб, в пикочната система и в малки области на човешката кожа.

Експертите най-лесно определят засегнатата кожа. На площадката има малки уплътнения, които с течение на времето се увеличават, нахлуват с белезникава течност.

Най-често причинителят на туберкулоза може да бъде взет, когато говори с болен човек, когато кашля или киха. Обикновено болестта протича без симптоми или има отворена форма, но PCR диагностицирането на туберкулоза прави възможно откриването му в ранните стадии и при спешни случаи.

Симптомите на заболяването: продължителна мокра кашлица, повишена температура, студени тръпки, прекомерно изпотяване през нощта, рязка загуба на тегло, чувство на умора и слабост.

Отворената форма на заболяването е най-опасна. Човек, страдащ от туберкулоза, може да зарази здрави хора.

Най-важният симптом на белодробно заболяване е хемоптиза. Той се среща във всяка форма на заболяването.

В някои ситуации това може да доведе до кървене от белите дробове на човека. То е много опасно и изисква спешна медицинска намеса.

За предотвратяване и разпознаване на туберкулоза експертите предписват: проба - туберкулинов тест, изследване на биологичен материал, флуорография, рентгенови лъчи и кръвен тест, слюнка или слюнка.

Диагностика на заболяването

Подобрена диагностика на заболяването - това е правилното и по време на лечението започна. В повечето случаи обичайните методи за откриване на патогени не винаги имат ефект и вече са остарели.

Най-важният начин да се идентифицират и диагностицират белодробните заболявания са медицинските изследвания. Обикновено се използва PCR диагностика. Това проучване е открито съвсем наскоро, през 1983 г., от американския биохимик Mullis.

Тестът при пациенти с белодробна туберкулоза се извършва изключително в специални случаи, когато е трудно да се установи диагнозата или е невъзможно да се открие болестта по инструментален начин.

Полимеразната верижна реакция е надежден PCR метод. Този анализ дава възможност да се определи причинителят на това колко е в кръвта, урината и течностите на гръбначния мозък. Такъв медицински преглед е най-безопасният.

PCR анализът дава 100% резултат.

Той има висока чувствителност, която помага да се разпознае болестта за първи път часове след заразяването, преди да се появят симптоми на заболяването. Този метод на анализ дава резултат в рамките на няколко часа след доставянето на биологичен материал. Засяването на този анализ се извършва три пъти, но аспирацията на болния стомах се извършва само в болницата.

Разработени са три критерия за определяне на резултатите: висока точност, чувствителност до 90%, специфичност.

Тестът за PCR се използва в някои случаи:

1. за диагностициране на белодробна туберкулоза;
2. определяне на източника на заболяването;
3. дефиниране на извънпулмонална локализация;
4. диагноза на рецидив.

Оценете резултата и предпишете правилното медицинско лечение, може само специалист. Много е важно да се определи правилната схема на лечение за откриване на туберкулоза, необходимо е да се проведе тест за чувствителност на патогена към противотуберкулозни устройства.

Разнообразие от медицински тестове за туберкулоза

Можете да направите необходимия анализ по два начина: вземете кръв или слюнка от човек или вземете слюнка.

Кръвните тестове чрез PCR могат да бъдат два вида: ELISA и PCR. Такова проучване помага да се наблюдава ефективността на медицинското лечение.

ELISA помага да се намерят антитела в човешкото тяло, които се противопоставят на туберкулозните микроби. Това изследване се провежда веднъж дневно. Основният недостатък е ниската му чувствителност, която позволява да се определи само заболяване с ниско ниво на инфекция.

Най-популярното и ефективно изследване е анализът на микобактерията туберкулоза. С нея лекарите могат лесно да открият ДНК на бактериите в човешката кръв. Този метод се използва също за определяне на броя на бактериите, за контролиране на лечението на пациента, за откриване на ранен рецидив.

PCR слюнката е един от най-модерните изследователски методи. Такъв анализ ще помогне да се идентифицират инфекциозните бактерии в слюнката. Използването на PCR увеличава броя на ДНК фрагментите на вредните микроби.

Методът за култивиране е предназначен за изследване на човешка храчка, за откриване на микробактерии.

Подготовка за PCR тестване

Внимание, необходимо е правилното приготвяне на слюнка за PCR. Ако не се спазват всички предписания, анализът може да бъде фалшиво положителен.

Преди да се направи тест, е забранено да се пуши, да се приемат храна и лекарства, както и да се консумира алкохол за 12 часа. Забранено е да си миете зъбите, не можете да използвате помощно средство за изплакване, освежител за устата и конци за зъби.

Забранено е използването на червило и влизане в интимни отношения. Допуска се изплакване на устата с обикновена преварена вода;

Този преглед ще помогне да се идентифицират: херпес, хламидия, туберкулоза, патогени на пневмония, онковируси, баролеоза, мононуклеоза, ХИВ, хепатит от всички видове, рубеола.

Анализът на микобактериите се извършва главно в противоречиви случаи, а именно, ако е трудно да се постави диагноза или е имало контакт с пациент с туберкулоза, преди започване на операцията, за откриване на заболяването. Използва се за преглед на бременна жена, тъй като този метод е най-безопасен за майката и плода.

Понякога анализът се извършва в частна клиника, тъй като пациентът не се придържа към правилата за тестване, но в същото време се притеснява от всички симптоми. Анализът може да се извърши, когато специалистите не са сигурни след провеждане на теста Манту или пациентът е дете.

Предимства и недостатъци на медицинските тестове за определяне на туберкулоза

PCR е най-популярният и ефективен начин за определяне на заболяването.

Най-голямата му разлика от другите изследвания е бърз и точен резултат.

Предимството на този медицински преглед е, че може да се извършва при урологични, гинекологични, онкологични, инфекциозни, хематологични, белодробни, гастроентерологични и други изследвания.

Основното предимство на такова медицинско проучване е, че кръвните изследвания, слюнката и слюнката са готови за кратко време (ще отнеме 5 часа за откриване на заболяването). Подобен медицински преглед позволява провеждането на тестове, когато са забранени или недостъпни определени методи за изследване на болестта. Чудесно за откриване на рецидив при хора.

Благодарение на този анализ стана възможно провеждането на изследвания за всяка биологична среда. Разрешено е да се вземат материали от деца. PCR прави възможно идентифицирането на причинителя на всеки етап от заболяването. Благодарение на високата си чувствителност, микробите могат да бъдат открити, дори ако са налице само няколко бактерии.

PCR методът разширява възможностите му. Използва се също за определяне на бащинството, за производството на нови гени, мутации, за кръстосване на ДНК елементи и т.н.

Недостатъците на това изследване са скъп метод за изследване.

След медицинско лечение, кръвен тест може да покаже наличието на живи или мъртви патогени в малки количества, след медицински преглед, ще даде положителен резултат.

Бактериите и микробите могат да бъдат подложени на мутация, след което PCR няма да може да ги идентифицира и идентифицира, следователно само специалист може да предпише изследване на необходимата среда, в противен случай такъв медицински преглед ще бъде неефективен.

След тестването има отрицателен резултат, но това не изключва възможността човек да бъде заразен с туберкулоза. Такъв медицински преглед се извършва за пациенти с тежко белодробно заболяване, когато други изследвания не дават точни резултати. PCR ще бъде полезна за хора с белодробна и извънбелодробна туберкулоза.

За съжаление, медицинското оборудване за откриване на патогени от туберкулоза е много скъпо.

Обществените болници и клиники не могат да си го позволят, но платени клиники вземат тестове за пациенти и предоставят готови резултати за кратко време.

PCR диагностика на туберкулоза

Туберкулозата е специфична инфекция, фокусът му може да бъде в човешките тъкани в продължение на години и след това да се разпространи в продължение на няколко месеца. Това е хронично заболяване, чиито оптимални схеми на лечение са трудни за избор. Една от причините за това е късната диагноза, когато микобактериите, докато са в човешкото тяло, вече са се адаптирали към много лекарства.

Какви съвременни методи за диагностика съществуват? PCR диагностика - какво е това? Как се извършват тези изследвания? В какви случаи е диагностицирана туберкулоза по този метод и каква е неговата същност?

Какво е PCR диагностика

Това е един от най-модерните методи за диагностициране не само на болестите, но и на откриването на биологичен материал. PCR диагностиката е изобретена сравнително наскоро. Преди около 30 години през 1983 г. американски биохимик, Кари Банкс Мълис, предложи комплексна схема за възстановяване на биологичния материал от микроорганизми в един кратък сегмент. Благодарение на откритието си, ученият е награден с най-високата награда - Нобелова награда.

Какво е това - PCR диагностика на инфекции? Полимеразната верижна реакция (PCR) е диагноза за откриване на вирусни заболявания, базирана на методите на генното инженерство. Широко се използва в медицинската микробиология, имунология и вирусология. Методът е универсален и помага да се постави диагноза с малко количество материал. Инфекцията може да бъде открита буквално в първите часове на заразяване с нея, много преди появата на първите симптоми на заболяването.

Методът се състои в получаване от материала на болен човек не на самия патоген, а на фрагменти от генома (ДНК частици), неговата биосинтеза с последващо определяне към кой клас микроорганизми е получен генетичният материал чрез молекулярно-генетични методи.

Въпреки факта, че това е сложен процес, отнема много по-малко време от много биологични методи за откриване на инфекциозни агенти. Само за няколко часа може да се открие микроорганизъм чрез PCR. За да направите това, няма нужда да го изолирате от околната среда (кръв, гръбначно-мозъчна течност, храчка) и да го отглеждате дълго време върху изкуствени хранителни среди. Достатъчно е, че малък фрагмент от ДНК веригата на инфекциозния агент присъства в изследвания материал.

В основата на реакцията е възможността при изкуствени условия (in vitro) да се създаде синтез на молекули на нуклеинова киселина на инфекциозния агент.

Какво е необходимо за PCR?

1. Праймерите са ДНК сегментите, от които започва биосинтезата или създаването.
2. Нуклеотиди или комплексни съединения, които са в основата на ДНК или РНК молекула.
3. Полимеразната верижна реакция е невъзможна без наличието на полимераза, която е ензим, ускоряващ PCR.

Етапи на PCR диагностика

Как се осъществява молекулярната диагностика чрез PCR? Процедурата е проста и отнема кратко време, като се взема предвид събирането на материала.

1. Преди започване на изследването, те вземат необходимия биологичен материал - това е бронхиалната промивна вода, кръвта, стомашното съдържание, храчките. Видът на биологичния материал зависи от предполагаемия патоген.
2. Денатурация или унищожаване на първичната структура на ДНК, която се състои от две вериги. Същността на този етап е да се разделят двете вериги под въздействието на висока температура (максимумът е 98 ° C, който продължава не повече от две минути).
3. На следващия етап на PCR, наречен отгряване, температурата се намалява с няколко градуса, така че праймерът ще се свърже с ДНК веригата.
4. Удължение, по време на което директно се осъществява синтеза на желаните молекули.

В резултат на това само 25-30 такива цикъла получават необходимия брой копия на ДНК на микроорганизма, които лесно се разпознават.

Дали PCR изисква диагностициране на туберкулоза?

Не е възможно абсолютно всички хора със съмнение за туберкулоза да извършват PCR, тъй като методът изисква скъпо оборудване. Не всички публични клиники могат да си позволят да я купят. Освен това се случи така, че обичайните методи за диагностициране на инфекция в повечето случаи също се оправдават.

Те включват:

• изследване на пациента, вземане на история;
• пълен преглед на лицето;
• изследване, използващо Mantoux туберкулинов тест;
• радиография или флуорография;
• компютърна диагностика, ако е необходимо;
• микробиологични методи за изследване: микроскопия на намазка и бактериологично изследване на храчка.

PCR за туберкулоза се извършва в специални случаи, когато е трудно да се постави диагноза или не е възможно да се извършат други инструментални методи.

Въпреки изобилието от диагностични методи, честотата на туберкулозата продължава да нараства. В момента има не само растеж, но и други характеристики:

• заболяването често се среща в тежка форма;
• увеличава се броят на фаталните случаи;
• все по-устойчиви на съвременна химиотерапия са диагностицирани форми на заболяването.

Нежеланието на самите хора да се подлагат на рутинни медицински прегледи годишно, отхвърлянето на ваксинацията води до разпространение на туберкулоза. В такива условия са ни необходими бързи, информативни и ефективни изследователски методи, които трябва да бъдат достъпни за деца и възрастни. Всички горепосочени диагностични методи са много по-ниски от PCR.

Ползи от диагностицирането на туберкулоза с PCR

Това изследване, макар и ново, се е доказало добре, особено в спорни случаи, когато е невъзможно да се постави диагноза по редица причини.

Благодарение на PCR е много по-лесно да се открие причинител на туберкулоза в тестовия материал.

Предимствата на PCR диагностиката са следните.

1. Това е бърз анализ. Малък фрагмент от ДНК молекулата може да бъде използван за диагностика само за няколко часа (около пет), който успешно се използва в извънредни ситуации, когато, например, преди операция е необходимо да се определи дали човек е болен от туберкулоза.
2. PCR анализът е позволен в случаите, когато други методи са недостъпни или забранени (за откриване на белодробна туберкулоза, понякога трябва да вземете няколко рентгенографски изображения, които ще бъдат голяма доза радиация).
3. С помощта на PCR, всяка биологична среда се изследва за наличие на патоген в нея. Например, можете да провеждате изследване на гръбначно-мозъчната течност, ако има съмнение за туберкулозен менингит.
4. Позволена PCR диагностика на инфекциозни заболявания при деца, тъй като методът е безопасен.
5. Позволява ви да идентифицирате патогена на всеки етап от заболяването.
6. Високата чувствителност на PCR дава възможност за откриване на Mycobacterium tuberculosis, дори ако в биологичния материал има само няколко микроорганизма.
7. Добре е да се направи диагноза за рецидив на заболяването.

След всички прочетени PCR изглежда почти перфектен диагностичен метод, който трябва да направи всеки с подозрение за туберкулоза. Но има и недостатъци тук, те трябва да бъдат взети под внимание.

Недостатъци на PCR при диагностицирането на туберкулоза

В наше време такава диагностика е по-рядка от редовността. И за това има причина.

1. Това е скъп изследователски метод. В много клиники оборудването за PCR липсва поради високата му цена, но анализът все още може да се направи в платени лаборатории.
2. Веднага след лечението, мъртвите микобактерии или живеещите в малки количества все още могат да присъстват в човешкото тяло (резултатът ще бъде положителен по време на PCR диагностика), така че методът ще бъде ненадежден в този момент, няма смисъл да се извършва.
3. Мутациите на микобактериите водят до неефективна PCR - нормална последователност на ДНК не може да бъде синтезирана.
4. Необходимо е да се избере подходящата среда за изследването, кръв се взима само ако се подозира, че е заразена (сепсис), няма нужда да се приема храчка, ако има въпрос за туберкулоза на органите на нервната система. В този случай PCR няма да може да открие патогена и диагнозата ще бъде неинформативна.

Показания за откриване на туберкулоза чрез PCR анализ

PCR диагностицирането на туберкулоза се извършва най-често при спорни случаи. Кога лекарите правят това изследване?

1. Ако е трудно да се направи диагноза по обичайните налични методи, но има контакт с пациент с туберкулоза.
2. В случай, че човек не може да бъде предаден в клиника, за да премине рутинни рутинни тестове за туберкулоза, е по-лесно да го изследва с помощта на PCR, тъй като храчките за теста могат да бъдат доставени в бурканче и диагнозата се потвърждава в рамките на няколко часа.
3. Ако човек има спешна операция и спешно трябва да разбере дали е болен от туберкулоза.
4. Ако е необходимо, по-добре е бременната жена да се изследва за туберкулоза, използвайки PCR, тъй като методът е безопасен.
5. На платена основа всеки, който не е бил диагностициран с туберкулоза, е бил потвърден с бактериологични методи и флуороскопия. Това се случва, когато лезията в белите дробове е незабележима в директния образ, а човекът по време на раждането на храчки за изследването не може да следва препоръките за правилно събиране на материала. В този случай, човек е притеснен за всички симптоми, характерни за белодробна туберкулоза.
6. Когато има съмнения относно резултатите от теста Манту.
7. За предпочитане е да се направи PCR диагностика на туберкулоза при деца. Процедурата е безопасна, не създава допълнителна радиационна експозиция и е ефективна при откриване на трудни за диагностициране форми на заболяването.

Навременното диагностициране на туберкулозата е ключът към правилно предписаното лечение и намаляването на разпространението на болестта. Често познатите методи за откриване на заболявания не винаги са ефективни. Следователно, PCR днес е един от най-надеждните и безопасни начини за откриване на инфекция в ранните етапи на неговото развитие.