PCR анализ (диагностика) на туберкулоза

Симптоми

Туберкулоза или консумация - една от най-популярните инфекциозни заболявания на 21-ви век. Нейните патогени са специални микробактерии - кочови пръчки.

Заболяването се разпространява не само в белите дробове, но и в мозъка, храносмилането, ставите или гръбначния стълб, пикочната система и кожата.

Според СЗО 10 милиона души страдат от туберкулоза всяка година, от които 3 милиона са фатални.

Ситуацията е особено тъжна на територията на страните от ОНД, тук туберкулозната епидемия се среща периодично. Русия, Казахстан, Украйна се ръководят от тъжен рейтинг за разпространението на тази инфекция.

Инфекцията лесно се предава чрез въздушни капчици или чрез храносмилателната система, засяга жизненоважни органи и също така е в състояние бързо да се адаптира към полимерни лекарства и химиотерапия.

Един от основните фактори за успешното лечение на туберкулозата е своевременното откриване на инфекцията.

Диагностични методи

Човечеството е изобретил много методи за разпознаване на опасна болест. Диагностиката на туберкулозата е разделена на инструментална и лабораторна.

В първия случай, кръвен тест за туберкулоза, както и слюнка, урина.

Втората група е изследване с рентгенова и ендоскопия. Инструменталните методи за диагностициране на туберкулоза от своя страна са радиационни и хирургически.

Видове радиационни методи за откриване на болестта

  • Флуорографията е метод за диагностициране на заболяване, познато на всеки жител на ОНД. С помощта на рентгенови лъчи се изследват белите дробове и лимфните възли.
  • Рентгенография на гръдния кош - подобна на флуорографията, но по-добър метод за откриване на инфекция. Картината е получена по-подробно и в две прогнози, но тази процедура е около шест пъти по-скъпа. Обикновено се използва след сериозни подозрения за заболяването.
  • Компютърната томография се извършва като допълнителна диагноза, която се използва и след основателна причина за наличие на инфекция.

Хирургичните методи за диагностика включват бронхиална ендоскопия, както и медиастиноскопия и торакокоскопия.

Първият метод е да се изследва бронхиалното дърво на белите дробове с помощта на „сонда” в този орган. Останалите два метода дават възможност да се изследва плевралната част на белия дроб чрез пункция на гърдите.

И трите метода са сериозна хирургична намеса и се използват най-често в процеса на прогресиране на заболяването.

Лабораторните тестове включват:

  • Анализ на храчки за бацила на туберкула.
  • Микроскопско изследване.
  • PCR диагностика на туберкулоза

Какво е PCR диагноза?

Един от най-модерните методи за лабораторна диагностика на инфекции специалисти наричат ​​полимеразна верижна реакция.

Този метод е разработен от известния американски учен Кари Мулис през 1983 г., за което той е носител на Нобелова награда.

PCR анализът е изолиране на ДНК частици от храчки, кръв, гръбначномозъчна течност, изпражнения и др. за тяхната последваща биосинтеза.

С помощта на комплексно молекулярно генетично изследване се определя естеството на микробите в тялото на пациента.

Този вид анализ за туберкулоза се извършва на няколко етапа:

  • Първо се вземат биологични проби. Материалите се поставят в специални контейнери и се изпращат в лабораторията.
  • В изследователския център анализите се загряват до 97 градуса. Това позволява да се разруши структурата на генома на ДНК на микроорганизми, която се състои от няколко вериги.
  • Температурата е специфично понижена, така че праймерите (участници в ДНК, от които започва процесът на биосинтеза) могат да се свържат към всяка верига на дезоксирибонуклеинова киселина.
  • След това се извършва биосинтезата на молекули, необходими за откриване.

След 25-30 повтарящи се цикъла в лабораторните изследвания лекарите имат възможност да разберат дали инфекциозните микроорганизми присъстват в тялото на пациента или не.

Предимства и недостатъци

PCR за туберкулоза е най-модерната диагностична техника. Методът позволява откриването на инфекцията на всеки етап с висока надеждност. предимства:

  • Скорост - изследването отнема не повече от пет часа. Резултатите от теста за туберкулозни микроби могат да бъдат намерени в рамките на 24 часа.
  • Безопасност - PCR методът няма възрастови противопоказания.
  • Навременност - тази техника ви позволява да откривате туберкулоза в тези стадии, когато болестта няма симптоми.
  • Висока степен на точност - ако в анализите има само няколко микроорганизма, те ще бъдат намерени чрез полимеразна верижна реакция. Също така, тази техника прави възможно лесното идентифициране на причинителя на туберкулоза.
  • Универсалност - диагностиката се използва не само за откриване на консумация, но и за други заболявания като хламидия, гонорея и др.

Въпреки многото предимства, използването на тази техника във вътрешната медицинска практика е по-скоро изключение, отколкото правило. Има няколко причини за това.

Недостатъците на този метод са:

  • Високата цена на проучването.
  • Методът не е подходящ за тези, които са преминали терапия, тъй като наличието на мъртви бактерии Кох може да доведе до фалшиво-положителен резултат.
  • В случай на мутация на инфекциозни микроорганизми, техният геном не може да бъде разпознат чрез погрешно заключение.
  • Важно е да изберете правилната среда за откриване. Например, резултатът от кръвен тест за PCR за туберкулоза (разреждане) ще бъде отрицателен, ако нервната система е заразена.
  • Не винаги е възможно този метод да се приложи при пациенти с диагноза белодробни лезии.

В допълнение, такъв анализ за туберкулоза изисква модерно оборудване, което 90% от болниците нямат. В ОНД такъв анализ може да се извърши от мрежата на клиники Invitro

Условия за анализ

Препоръки за пациенти, подложени на такъв тест за туберкулоза, варират в зависимост от вида на анализите, които преминават.

Когато вземате кръв за PCR, е необходимо да се въздържате от пушене един час преди процедурата, за двама да спрете приема на алкохолни напитки и мастни храни.

Препоръчително е също така да се въздържат от физическо натоварване, също така е невъзможно да се вземе кръв за туберкулоза на празен стомах.

Когато вземате тампон от устата и носната кухина, не можете да ядете 2-4 часа преди процедурата, в противен случай няма да е информативен. Също така, не пийте алкохол.

За прецизното отчитане е забранено пушенето по-рано от час преди процедурата. В навечерието се въздържайте от миене на зъбите и използване на спрейове и спрейове за устата.

Ако подозирате туберкулоза на урогениталната система, пациентът за 2-3 дни преди раждането трябва да изключи секса, за 2-3 часа преди процедурата, да не отидете в тоалетната “по малък начин”. Гениталните органи трябва да се мият с обикновена вода без специални средства.

На жените се препоръчва да не използват вагинални таблетки, свещи, топки и да се въздържат от тестове в критични дни.

5 дни преди раждането, резултатът е необходим, за да се откаже от процедурата на колпоскопия, както и от трансвагинален ултразвук,

Кога се използва PCR диагностика?

Не всяка клиника има такава сложна диагноза, но лекарите все повече прибягват до такива методи на изследване. Обикновено този вид анализ се извършва в специални ситуации.

  • В случай на съмнителни резултати от манта може да се използва кръвен тест за туберкулоза.
  • В случаите, когато пациентът е бил в контакт със заразено лице, но лекуващият лекар не може точно да определи диагнозата.
  • В случай на спешна операция, когато е необходимо да се установи за кратко време дали пациентът има тази инфекция.
  • Когато пациентът е бременна, когато други методи на изследване не са достатъчно безопасни за новородено бебе.

Трябва да се отбележи, че тази диагноза се препоръчва на децата поради нейната безопасност.

Ако студентът има противопоказания срещу туберкулинов тест, той може да вземе кръвен тест за туберкулоза вместо мантия чрез PCR.

PCR анализ за диагностициране на туберкулоза

Медицината никога не стои неподвижно и досега напредъкът в сектора на здравеопазването дава възможност за диагностициране и излекуване на много от предишните незасегнати заболявания. Има и болести, които не могат да бъдат открити чрез визуална инспекция. Туберкулозата винаги е била сред тях. Това е опасна инфекциозна болест, която засяга белите дробове, ставите и костите и често води до смърт дори и в наши дни. Диагностичните методи за това заболяване са подобрени, което прави възможно откриването на заболяването на по-ранни етапи, когато е лечимо. Сред тях са не само рентгенови и мантови тестове, но и PCR за туберкулоза.

Туберкулоза - какво е това

Преди това туберкулозата се наричаше сухо заболяване или фтиза. Това е бактериална инфекция, която най-често засяга белите дробове. Неговите екстрапулмонарни форми - туберкулоза на костите и ставите, туберкулозен менингит - са по-чести и по-напреднали. За причинителя на това инфекциозно заболяване са микобактериите. Бацилът на туберкулозата се нарича също и пръчицата на Кох.

Инфекцията с туберкулоза е много заразна, тя се предава от въздушни капчици при кашляне и кихане на пациента. Единствената защита срещу тази болест е навременната доставена ваксина. Той не предпазва от инфекции, но не позволява на бацилите да проникнат в организма, за да причинят туберкулоза.

Форми на туберкулоза

Заболяването може да се прояви както в отворена, така и в затворена форма. Разликите са както следва:

  • затворена туберкулоза е асимптоматична. При такива обстоятелства, кочовата палка в храчките е невъзможно да се открие, следователно инфектираният не е опасен за околната среда. Подобен ход на заболяването обикновено не застрашава най-заразените, но има и изключения - в един от десет случая затворената туберкулоза е в състояние да отиде в отворена форма;
  • с отворена форма, микобактериите, които причиняват туберкулоза, се откриват в слюнката и храчките на пациента. Заразеният организъм представлява голяма опасност за обществото, дори в изолация. Като правило болестта първо засяга белите дробове. Ако не се диагностицира рано, тя може да приеме други форми, като туберкулоза на костите или ставите.

Отворената форма на туберкулоза се диагностицира по различни начини. Пациентът претърпява рентгенова снимка на гръдния кош или рентгенова снимка на гръдния кош, анализи на биологичния му материал или кожен тест на Манту. Неотдавна се появи друг метод, който се счита за еднакво ефективен - анализът на полимеразната верижна реакция (PCR).

Какво означава PCR?

В медицинската практика отдавна са използвани методи за диагностициране на това или онова заболяване чрез откриване на ДНК или РНК в човешкото тяло. Това е именно PCR за туберкулоза. Това е високо прецизен анализ на кръв или друга биологична течност, която ви позволява да идентифицирате бактерии с минимална концентрация в избрания материал, достатъчно е една клетка. Изследването се провежда с помощта на специален полимеразен ензим.

Предимства на метода

PCR е диагностичен метод, който се проявява от най-добрата страна, така че се използва доста често, както в комбинация с други методи, така и независимо. Неговите предимства:

  • най-кратките срокове на производство. Изследването се провежда бързо, след около 5 часа чрез PCR може да се открие наличието на туберкулозен бацил в биологичната течност на пациента. Това е особено вярно, ако трябва да извършите незабавна хирургична интервенция и преди това да получите точна диагноза;
  • Случва се, че други диагностични методи са противопоказани на пациента. Например рентгеновите лъчи не могат да се правят в никакъв случай. Освен това картината не винаги е възможно да се постави диагноза, особено ако заболяването е на ранен етап. С помощта на PCR метода, патогенът се открива незабавно;
  • Биологичната течност на всеки пациент е подходяща за анализ. PCR на урината и слюнката за туберкулоза се извършва за идентифициране на белодробни и екстрапулмонални форми. Изследването се провежда и с помощта на гръбначномозъчната течност на пациента за откриване на туберкулозен менингит.
  • Методът е абсолютно безопасен. За да го проведе, е достатъчно да се получи биологична течност от пациента. PCR диагностиката на туберкулозата при деца е удобна и безвредна, тъй като рентгеновото изследване е разрешено само на 18-годишна възраст, а тестът на Манту понякога причинява нежелани реакции;
  • PCR е високо чувствителен анализ. Позволява ви да идентифицирате коковите пръчки с минимална концентрация на микобактерии;
  • С помощта на специален полимеразен ензим, болестта се диагностицира на всеки етап, от ранна до напреднала;
  • този метод е ефективен при диагностициране на рецидив на заболяването;
  • Този метод е пробив в правенето на точни диагнози в ранните стадии на заболяването. Това ви позволява да започнете лечение в най-кратки срокове и да унищожите патогените, когато те все още не са имали необратимо отрицателно въздействие върху органите и системите на човешкото тяло.

Къде да се направи PCR анализ за туберкулоза

Въпреки че PCR анализът за туберкулоза е високо ефективен метод за диагностициране на това заболяване, той рядко се използва самостоятелно. По правило това е допълнителен метод за откриване на туберкулоза и се използва рядко. Факт е, че този метод е доста скъп.

Обществените клиники нямат възможност да закупят специално оборудване за извършване на PCR анализ, а правителството не вижда смисъл в финансирането на тази статия, тъй като туберкулозата може да бъде диагностицирана по други начини. Такова проучване най-често се извършва в частни клиники, които могат да си позволят закупуване на необходимото оборудване.

Недостатъци на метода

Високата цена не е единственият недостатък на PCR. В допълнение към високата цена, методът има и други недостатъци и недостатъци, например:

  • PCR за туберкулоза дава положителен резултат дори след лечение, тъй като отнема мъртвите клетки като живи бактерии, следователно този метод не е подходящ като контролен преглед на пациента, за да потвърди възстановяването му;
  • туберкулозните бацили мутират и тяхната ДНК се модифицира, което може да повлияе на надеждността на резултата;
  • РЛР кръвни тестове за туберкулоза рядко се извършват, тъй като присъствието на пръчки Koch в тези биологични течности е изключително трудно за откриване. Това е възможно само в последните етапи или при сепсис. Обикновено храчките на пациента се вземат за диагностика;

Заслужава да се отбележи, че най-точният резултат е именно събирането на съдържанието на стомаха на пациента. Ако се подозира белодробна туберкулоза, културата на храчки ще бъде най-ефективният начин за диагностициране на заболяването. Ако пациентът има екстрапулмонална форма, тогава може да няма бактерии в тази биологична среда. За да се определи туберкулозата на костите, ставите и т.н. с помощта на PCR, е необходима друга биологична течност, например спинална течност.

Как е PCR за туберкулоза

Както е описано по-рано, същността на PCR анализа е да се открие ДНК на патогена в биологичната течност на пациента чрез полимеразната реакция. Основните етапи на метода:

  1. Вземане на проби от биологичен материал. PCR не е само хемотест - изследваната биомаса може да бъде слюнка, урина, цереброспинална течност, бронхиална промивна течност, стомашно съдържание, храчки.
  2. След това биомасата е изложена на високи температури, за да унищожи ДНК структурата на патогена.
  3. След това температурата постепенно намалява и праймерът се прикрепя към унищожения ДНК елемент.
  4. Според резултатите от молекулярния синтез, който отнема около 30 цикъла, се открива щамът на дадена патогенна бактерия или неговото отсъствие.

Този анализ изисква добро финансиране, така че PCR не се извършва много често. Въпреки това, този метод няма равни, когато други диагностични опции са забранени, или в случай на извънредна ситуация, когато няма време да се изчака резултатът.

Обобщава

В заключение можем да направим следните заключения:

  • PCR е високо точен анализ, който може да открие туберкулоза няколко дни след инфекцията;
  • този анализ се извършва за 3.5 - 5 часа, така че в случаите, когато сметката върви към часовника, тя е незаменима;
  • това е безопасен метод, който няма странични ефекти;
  • Използва се, когато други диагностични методи са показали противоречиви резултати или употребата им е противопоказана.

Въпреки това, PCR рядко се прави, тъй като това е скъп анализ, който изисква инсталирането на специално оборудване. Освен това той не винаги е информативен, така че експертите използват този метод за откриване на туберкулоза като допълнителен.

Какво е PCR анализ за туберкулоза

Иновативен метод за откриване на микроорганизми, изобретен от учения Cary Mullis в края на миналия век - PCR анализ. Той получи за своите писания Нобелова награда. Напълно този процес се нарича полимеразна верижна реакция. Състои се в възстановяване на вида на микроорганизма в предоставения биоматериал с помощта на къси ДНК фрагменти. Това ви позволява да откривате инфекция на ранен етап и да започнете лечение незабавно, без да доведе до сериозни симптоми и усложнения.

Какъв е анализът

Диагнозата чрез PCR е да се получат сегменти от патогенна ДНК от биологичен материал и да се подредят в правилната верига. Това позволява идентифицирането на микроорганизма, към който принадлежат клетките.

Процедурата се извършва на три етапа:

  1. Събиране на биологичен материал.
  2. Идентифициране и подреждане на ДНК.
  3. Признаване на инфекция.

Това проучване изисква специално медицинско оборудване - усилвателно. Той е оборудван с камера, където изучаваният материал взаимодейства с високотемпературни и химически ензими. На изхода лабораторният техник има дълга ДНК верига на причинителя, ако има такъв в човешкото тяло.

Как да се подготвим за диагнозата

PCR анализът е сложен процес на генно инженерство, който изисква точност и сериозност както от лабораторните техници, така и от пациентите. Голяма роля в коректността на резултатите от анализа играе подготовката за процедурата, т.е. правилното събиране на материала.

Основните източници на информация за болестта са:

Могат да се използват и други варианти, течности, ако е необходимо, се вземат за анализ от различни органи.

За пациента има определени правила, които трябва да се спазват преди процедурата. Ако има кръвен тест, той е забранен за 8 часа преди събирането:

  • ядат храна;
  • да пуши;
  • Пиене на алкохолни напитки;
  • приемайте лекарства вътре.

Вечерта, преди събирането на храчки, лекарството се изпива, за да се разреди и да се улесни отхрачването. Сутрин събирайте материала след пълна хигиена на устната кухина.

Урината се събира в стерилен буркан сутрин на празен стомах, след измиване, преди да се вземе каквото и да е лекарство.

Ако човек приема антибиотици, анализът на полимеразната верижна реакция трябва да се отложи, в противен случай резултатът от PCR не е надежден. Спутумът или кръвта трябва да се дарят две седмици след края на курса на лечение.

Как протича процеса на идентифициране на бактерии

Накратко, процесът е да се изолира част от ДНК. Използването на съвременни методи на генното инженерство ни позволява да определим вида на микроорганизма. Освен това материалът за анализа се нуждае от малко количество.

Технически това е много сложна процедура, но отнема по-малко време от класическите бактериологични изследвания. Не е необходимо патогените да бъдат изолирани от биоматериала, няма нужда да се отглеждат за няколко седмици. В деня на раждането пациентът вече може да знае резултата от своя анализ.

Целият процес на PCR протича на етапи:

  1. Работи се с основната форма на ДНК, която при висока температура, близка до 100 градуса, се разделя на две вериги.
  2. Температурата намалява, нишките са свързани с фрагментите на нуклеиновата киселина - праймера.
  3. Настъпва удължение - синтез на молекулна структура.

Цялата сесия се състои от около тридесет такива процедури, повтаряйки един цикъл като верижна реакция. Това е необходимо, за да се създаде броя на клетките, в които получените бактерии стават разпознаваеми.

Заключение на проучването

Описание на резултата от PCR (полимеразна верижна реакция) дава лекар на туберкулоза, той е прост или разгърнат. В първия случай, описанието ще съдържа само информация за наличието или отсъствието на пръчки Koch. Ако декодирането е подробно, от него можете да разберете степента на заболяването, неговия фокус. Според тези критерии е възможно да се определи най-подходящото лечение за туберкулоза във всеки отделен случай.

Анализът на полимеразата на верижната реакция не прави разлика между живи и мъртви патогени и говори само за тяхното присъствие. Следователно, има смисъл да се премине втори тест за туберкулоза само 3-4 седмици след приемане на терапията, предписана от лекаря.

Ако резултатът е положителен, върху заключението се поставя надпис “Mycobacterium tuberculosis”. Ако има отрицателен резултат, до биологичното име на бактериите има знак "не е открит". Анализите могат да бъдат фалшиво положителни. Това се случва рядко - в случай на нарушение на техниката на провеждане на PCR проучвания или в присъствието на нежизнеспособни микроорганизми. Окончателното заключение за заболяването може да бъде направено само от лекар по туберкулоза.

Предимства на метода

PCR диагностиката на туберкулозата придоби популярност по много причини. Той има много предимства, включително:

  1. Точност на изследванията. При анализиране на технологията е възможно да се идентифицират бактерии, дори ако те се намират в малки количества.
  2. Бърз резултат. Целият процес от събирането на материала до крайния изход отнема около 5 часа. В сравнение със засяването, тя трябва да изчака до няколко седмици.
  3. Пълна безопасност за човека, за разлика от флуорографията с радиацията.
  4. Използва се всеки течен биоматериал. За PCR при белодробна туберкулоза, храчките дават най-точна информация, при туберкулозен менингит се взема проба от гръбначния мозък. Анализ на кръвта помага да се идентифицират локалните огнища на инфекцията.
  5. Изследва се чувствителността на бактериите към антибиотици. Това ви позволява да предпише правилното лечение.
  6. Ранна диагностика. Можете да научите за наличието на болестта преди началото на симптомите.

В допълнение към положителните аспекти, има и недостатъци. Основната е цената. Анализът на PCR не е евтин, което е свързано с използването на скъпо оборудване. Друг недостатък е необходимостта да се изчака времето за повторно тестване след курс на лечение за туберкулоза. Понякога резултатът от теста е фалшиво положителен. Това се случва поради бактериална мутация.

Когато е необходима PCR

PCR за белодробна туберкулоза няма противопоказания и е абсолютно безопасна. Следователно има определени ситуации и болести, когато това е единствената възможност за изследване.

Те включват:

  • бременност;
  • контакт с туберкулозен пациент;
  • трудности при определяне на диагнозата на белодробна болест;
  • преглед преди операция;
  • алергична реакция;
  • HIV инфекция;
  • млада възраст.

Можете да използвате метода на PCR в посока, която се издава в фтизиатрията, както и педиатър, лекар или пулмолог.

Какво може да замени PCR диагнозата туберкулоза

Други видове изследвания не са остарели, но продължават да се използват. Те се използват в случаите, когато не е възможно да се извърши PCR за туберкулоза. Освен това съвременният метод не е идеален, понякога неговите показатели се поставят под въпрос и изискват повторна проверка.

Следните методи помагат да се определи наличието на туберкулоза при човек:

  • туберкулинова диагноза (Mantoux);
  • рентгеново;
  • Тестване на биологичен материал за флора;
  • рентгенова снимка на белите дробове.

Тези изследвания са безплатни и достъпни за всички. Но те имат своите недостатъци:

  • Тестът за туберкулоза причинява алергии. Противопоказан при кожни заболявания.
  • Рентгеновите изследвания са придружени от радиация, която не е приложима за деца, хора с имунен дефицит и бременни жени.
  • Бактериологичните анализи отнемат много повече време, резултатът може да се изчака до един месец.

Алтернативите не са гаранция за стопроцентно правилно заключение. Най-често те се използват за превантивни цели. Диагностика на туберкулоза чрез PCR дава най-надеждната информация. Ако е възможно, по-добре е да го използвате.

Особености на туберкулозата при деца и необходимостта от PCR

Детето трябва да бъде особено защитено от болестта - туберкулозната инфекция може да причини сериозно увреждане на тялото с още не напълно оформен имунитет.

След въвеждане на палката на Кох в детския организъм, развитието на болестта преминава през следните етапи:

  • Латентен. Продължава до една година, без да показва никакви симптоми.
  • Интоксикация. Засяга цялостното здраве. Появява се слабост, апатия, липса на апетит, сънливост и намалена производителност. Постоянно леко повишена температура.
  • Основната форма на заболяването. Туберкулозата е локализирана, формирайки фокуса на заболяването. Детето има кашлица, задух, главоболие, подути лимфни възли.
  • Туберкулозен бронхоаденит. Симптомите са болки в лопатките, кашлица с различна височина на звука, хрипове.

Обикновено, туберкулин се инжектира, за да се идентифицира инфекцията под кожата на детето. Ако този вид изследване е противопоказано, тогава PCR за туберкулоза е незаменим вариант за диагностика. Децата обикновено вземат кръвен тест, но ако е необходимо, се събира слюнка. При най-малкото подозрение за наличието на туберкулоза се провеждат допълнителни изследвания, за да се гарантира положителен резултат и незабавно да се започне лечение на ранен етап, като се предотвратява развитието на болестта.

Съвременните изследователски методи винаги са по-бързи и по-надеждни. Жалко е, че поради скъпото оборудване, за да се направят такива тестове, има възможност не във всички лечебни заведения и населени места. Какъв начин за провеждане на прегледа обикновено се избира от лекаря, но пациентът има право да избира. Ако трябваше да направите PCR тест, кажете ни за него в коментарите. Ако статията е полезна за вас, споделете я в социалните мрежи - може би това ще помогне на вашите приятели.

PCR диагностика на туберкулоза при деца и възрастни: показания за

Преди 20 години Световната здравна организация призна, че степента на разпространение на туберкулозата е извън контрол и е достигнала мащаба на епидемия. Оттогава ситуацията не се е подобрила. Всяка година се диагностицират повече от един милион случая на болестта, от които почти една четвърт са фатални. През последното десетилетие заболеваемостта сред децата се е повишила, повечето форми на заболяването не се поддават на стандартна антибиотична терапия.

Днес една от глобалните задачи на медицината е разработването на такива диагностични методи, които ще позволят да се идентифицира патологията преди началото на изразени клинични симптоми. Една от тях е полимеразната верижна реакция (PCR) за туберкулоза, която помага за откриване на причиняващите болестните коки пръчки в кръвта, храчките и други биологични течности.

Диагностика на туберкулоза

Скрининговите тестове са насочени към откриване на пациенти, носители на туберкулоза и предотвратяване на разпространението на инфекцията в обществото. За деца под 14-годишна възраст се използва мантовият тест. Това е имунологичен тест, при който се инжектира подкожно доза туберкулин - сложна смес от генетичния материал на няколко вида микобактерии. Появата на силно изразена реакция показва активно протичащ инфекциозен процес.

За профилактичен преглед при възрастни, използващи флуорография или рентгенови лъчи. Тези методи помагат да се визуализират патологични лезии в белодробната тъкан. Това обаче създава трудности при диференцирането на туберкулозата от друга органична патология (злокачествени и доброкачествени новообразувания, възпалителни процеси, паразитни инвазии, професионално увреждане на белите дробове).

За да се изясни структурата и размера на патологичния фокус, може да са необходими допълнителни инструментални изследвания:

  • целенасочена радиография;
  • компютърна томография;
  • магнитен резонанс.

Методи за диагностициране на туберкулоза

В случай на съмнителни резултати и за назначаване на адекватна терапия, има нужда от по-точни диагностични методи, които позволяват да се изолира патогенът. Микроскопското и бактериологичното изследване на храчките се използва за дълго време за потвърждаване на белодробните форми на туберкулоза.

През последните години честотата на микобактериите на различни органи и системи - бъбреците, костите, червата, кожата - става все по-честа. За идентифициране на тези форми на туберкулоза, ултразвукови изследвания, култура на урина и фекалии, могат да се използват ендоскопски изследвания.

PCR диагностика за туберкулоза ще помогне да се потвърди наличието на кочовите пръчки в кръвта, както и неговата чувствителност към определени лекарства. Това е високо ефективен метод, основан на откриването на бактериален генетичен материал в различни биологични течности.

Специфичност и показания

Полимеразната верижна реакция е високочувствителен микробиологичен диагностичен метод, който се основава на принципите на генното инженерство. За да се потвърди наличието на патоген в биологичен материал, достатъчно е да се открие уникален фрагмент от нуклеинова киселина за него. PCR за туберкулоза може да открие бактерии в кръвта, слюнката, урината.

В момента са разработени няколко метода за анализ. Най-популярни сред тях са следните:

  • PCR в реално време;
  • микрофлуидна технология;
  • последователност и пиросеквениране.

PCR в реално време

Лабораториите най-често използват полимеразно-верижна реакция в реално време, тъй като намалява броя на фалшиво-положителните резултати, а самият процес на анализ отнема кратко време.

Предвид големия брой скрити форми на заболяването и неефективността на стандартните диагностични методи, PCR се използва все повече. Целта на този анализ е показана на:

  • идентифициране на подозрителни зони на рентгеновия лъч;
  • съмнителни резултати от туберкулинов тест;
  • невъзможността за провеждане на микроскопски и бактериологичен анализ на храчки при лица в тежко състояние;
  • провеждане на хирургични интервенции, когато е необходимо бързо да се гарантира, че няма инфекция;
  • недопустимост на използването на флуорография, рентгенови лъчи или компютърна томография (например при бременни жени и кърмене в случаи на свръх радиационна експозиция);
  • съмнение за извънбелодробна туберкулоза (препоръчва се да се използва не само кръв, но и храчки).

PCR диагностиката на туберкулозата се е доказала при изследването на деца, поради липсата на допълнителна експозиция и бързи резултати.

Процедура за подготовка и анализ

Не се изисква специален препарат за кръвна PCR. Въпреки това, за да се избегнат усложнения при вземането на кръвни проби и за да се получи висококачествен материал, трябва да се следват следните общи правила:

  • анализът трябва да се прави сутрин не по-рано от 2 часа след събуждане;
  • Трябва да ограничи приема на мазнини и пържени храни на ден преди вземането на кръв;
  • да се въздържат от ядене, чай и кафе в продължение на 8-9 часа, да се пие чиста вода;
  • Не пушете в продължение на поне 3-4 часа.

В случай на постоянни медикаменти (хормони, антикоагуланти, противовъзпалителни средства, антибиотици, разредители за кръв), трябва да уведомите лаборанта за това.

При доставка на храчки трябва добре да миете зъбите си и да изплаквате устата си няколко пъти. Събирайте материал в стерилен контейнер. За по-добри резултати може да се вземе отхрачващо или муколитично средство вечер.

Самата диагноза се състои от няколко етапа.

    Ограден материал. Тя може да се извърши в лаборатория и дистанционно. Някои видове материал, който пациентът събира самостоятелно (урина, храчки).

Разрушаването на структурата на нуклеиновите киселини (денатурация на молекули ДНК и РНК). За тази цел тестовият материал се загрява до температура от 98 градуса и се държи в продължение на няколко минути. В резултат на това двойната спирала се разтваря, образуват се едноверижни молекули.

  • Шега. След добавяне на грунд (кратък участък от нуклеинова киселина), температурата намалява с няколко градуса, активира се полимеразата.
  • Elognatsiya. Температурата се довежда до оптимално ниво, ензимната активност достига максимум и втората верига завършва в съответствие с Chargaff правилото за комплементарност.

    • За завършване на изследването е необходимо да се синтезира необходимия брой ДНК молекули - около 50 цикъла на горната реакция. Отнема около 2-3 часа. Положителният резултат от реакцията не винаги показва активния стадий на заболяването, но е индикатор за наличието на микроорганизъм в организма.

    Предимства и недостатъци на метода

    В сравнение с други микробиологични методи, PCR не отнема много време за откриване на Mycobacterium tuberculosis с помощта на PCR, резултатът може да бъде получен в деня на изследването.

    Друго предимство е високата специфичност на анализа, която дава възможност да се открие наличието на патогена с точност 90-95% в почти всеки биоматериал (кръв, урина, фекалии, гръбначно-мозъчна течност, слюнка, зачервяване на бронхи).

    Въпреки това, съществуват няколко недостатъка на метода:

    • доста висок процент на фалшиво положителни резултати (до 15%), което е свързано с откриването на неживи микроорганизми;
    • в някои случаи можете да пропуснете факта на заболяването, тъй като Mycobacterium tuberculosis често е подложен на мутации и промени в неговия генетичен материал;
    • ниска ефективност при изследване на хора с имунен дефицит;
    • високи разходи за изследвания, необходимостта от скъпо оборудване и реактиви.

    Какво може да бъде заменено?

    Предвид разнообразието от форми на туберкулозна инфекция, за по-точна диагноза и избор на лечение е необходимо да се комбинират няколко диагностични изследвания:

      Задължителният анализ за децата е тестът на Манту. Ако въвеждането на туберкулин (генетичен материал от микобактерии) се прояви явно реакция, може да се предположи, инфекция с туберкулозен бацил.

    Рентгенови методи могат да се използват за визуализиране на патологичния фокус. При диагностицирането на екстрапулмонална туберкулоза се използват ендоскопски методи с едновременна биопсия:

    • бронхоскопия помага да се идентифицират лезии на ларинкса, трахеята, бронхите;
    • колоноскопия - черва;
    • цистоуретроскопия - органи на отделителната система;
    • хистероскопия - женски полови органи. Тези методи не са специфични, за да се направи точна диагноза, патогенът трябва да бъде идентифициран.

    Общите клинични тестове ще помогнат за по-конкретно определяне на състоянието на организма. Необходима е пълна кръвна картина с левкоцитна формула.

    Увеличаването на броя на неутрофилите с понижено ниво на лимфоцити и увеличаване на скоростта на утаяване на еритроцитите (ESR) показва активен възпалителен процес на бактериална етиология. Да се ​​изключи увреждане на органите на отделителната система, като се използва общ анализ на урината и култура за стерилност.

    Понастоящем PCR се предлага в повечето частни лаборатории. Това изисква не само висококвалифицирани специалисти, но и скъпо оборудване, голям брой реактиви. Следователно използването на този метод е ограничено, въпреки високата му точност и специфичност.

    Какво е PCR за туберкулоза и как се прави тест?

    PCR за туберкулоза се предписва, когато е невъзможно да се постави диагноза или е невъзможно да се проведат други изследвания. Анализът прави възможно идентифицирането на пръчката Koch на най-ранните етапи и да започне лечението своевременно.

    Описание на PCR за туберкулоза

    Показания за PCR диагностика

    Видове PCR за туберкулоза

    Подготовка за анализа

    Как е PCR за туберкулоза

    Интерпретиране на резултатите от изследването

    Особености на PCR за туберкулоза при деца

    Колко струва PCR за туберкулоза?

    Коментари и ревюта

    Описание на PCR за туберкулоза

    PCR (полимеразна верижна реакция) за туберкулоза е точен анализ, който може да открие пръчка Koch за няколко часа. Диагностиката се основава на методи за генно инженерство. Лекарите изолират ДНК клетката, използвайки генно-молекулярните тестове, за да определят вида на патогените.

    Предимства на метода

    • ви позволява да идентифицирате патогена в ранните етапи, без проявление на видими симптоми;
    • диагностиката няма противопоказания и е разрешена за деца;
    • могат да се провеждат изследвания при вземане на минимално количество материал.
    • универсалност на изследванията на биоматериали;
    • Проучването е ефективно при определяне на рецидивите на заболяването.

    Недостатъци на метода

    Наред с предимствата, PCR проучванията имат и недостатъци.

    Основните са:

    1. Проучването не е навсякъде, където можете да минете. Тъй като оборудването за такава диагноза е скъпо, то се инсталира в платени лаборатории.
    2. PCR за туберкулоза може да даде положителен отговор, ако открие мъртви микобактерии, например след лечение.
    3. Мутациите на патогени значително намаляват ефективността на PCR метода, тъй като ДНК веригите не могат да се синтезират последователно.
    4. Необходимостта от внимателен подбор на биоматериал за анализ.

    Показания за PCR диагностика

    Изпрати на проучването следните указания:

    1. Ако е имало поне единичен контакт с пациент с туберкулоза и е трудно да се идентифицира заболяването с помощта на стандартни тестове.
    2. Има ситуации, в които не е възможно да се въвеждат лица за рентгенови или други изследвания. В такива случаи е много по-лесно да се достави храчките.
    3. Анализът се назначава в навечерието на предстоящата операция, когато е необходимо да се определи дали човек е болен или не.
    4. Ако пациентът има съмнителен резултат от реакцията на Манту.
    5. Назначавайте на бременни жени и деца, за да избегнете излагане на рентгенови лъчи.

    Видове PCR за туберкулоза

    Изборът на биоматериал за скрининг за туберкулоза трябва да се назначи индивидуално.

    За диагностициране на PCR за туберкулоза могат да се правят тестове:

    Кръвен тест

    Характеристики на кръвния тест за туберкулоза:

    1. Проведени в случаи, когато друга диагностика не е подходяща или противопоказана. Например, за да направите правилна диагноза, трябва да вземете повече от едно рентгеново изображение. Прекомерната експозиция не е безопасна за организма, така че е много по-лесно да се вземе кръв от пациент.
    2. Също така, лекарят може да даде посока на кръвта, когато получава противоречиви резултати след флуорография.

    Анализ на слюнката

    1. Анализът на слюнката е по-малко популярен и информативен от други изследвания, тъй като туберкулозата не засяга слюнчените жлези. Следователно в повечето случаи резултатът ще бъде отрицателен.
    2. Методът има за цел да идентифицира белодробни и екстрапулмонални форми.
    3. Ако цветът на пробата не се променя под действието на реагента, това означава, че няма патогени. Ако все пак възникне съмнение за заболяване, тогава се извършва допълнителен комплекс от анализи.

    Анализ на слюнка

    Анализът на храчки е най-информативен за откриване на патогени на туберкулоза. Пробите се вземат няколко пъти, като правило, три пъти е достатъчно. Това елиминира възможността от грешки при получаване на материал с ниско качество.

    Ако човек е заразен с туберкулоза, храчките в малки количества ще бъдат освободени заедно с кашлицата. При пациенти в напреднал стадий на заболяването, слузта ще се екскретира с кървави пластири.

    Не се препоръчва вземането на храчки за изследване, ако пациентът има съмнение за туберкулоза на костите или нервната система.

    Анализ на урина

    Анализът на урината е един от начините за откриване на екстрапулмонални форми на заболяването: бъбречна туберкулоза и пикочна система.

    В случай на белодробна форма на заболяването, общият анализ на урината е практически неинформативен, тъй като не се наблюдават изразени патологични промени.

    От видеото ще разберете кой лекар поставя диагнозата туберкулоза. Заснет по канал tuberculum. ЖП.

    Подготовка за анализа

    Когато се взема кръвен тест, PCR трябва да следва някои правила, за да се получи надежден резултат:

    • Препоръчва се да се направи анализ на празен стомах;
    • трябва да изключва алкохола в навечерието на проучването;
    • трябва да завършите приема на антибиотици 15–20 дни преди анализа;
    • Препоръчително е да се въздържате от пушене за един час преди вземането на кръв.

    При вземане на храчки за изследване също се препоръчва да се следват някои правила:

    • материалът се събира сутрин, затова предварително измиват зъбите си и изплакват устната кухина;
    • ако храчките не се движат добре, се препоръчва да се вземе отхрачващо средство вечер или да се инхалира;
    • Необходимо е да се спре приема на антибиотици 15 дни преди прегледа.

    За да се получи надежден резултат от анализа на урината, на пациента се препоръчва да се придържа към следните правила:

    • материалът трябва да се събира сутрин;
    • в навечерието не се препоръчва да се ядат храни, които могат да променят цвета на течността (цвекло, боровинки и др.);
    • Спрете приема на антибиотици за 15 дни преди прегледа.

    Как е PCR за туберкулоза

    Характеристики на материала:

    1. На пациента се взема кръвен тест сутрин от вена в лабораторията.
    2. За доставяне на храчки на слуз е необходимо непременно от ларинкса и за предпочитане без голямо количество слюнка. Нейният пациент трябва да плюе в специален стерилен контейнер, след което да я предаде на кабинета.
    3. Лекарите извършват изстъргване със специален инструмент от лигавицата на бузите.
    4. Урината се наема в специален контейнер. Вземете средната част на сутрешната част.

    Молекулярно-генетичната реакция чрез PCR се извършва с помощта на специално устройство, наречено амплификатор. За изучаване на необходимите ДНК сегменти, който започва синтеза на молекули.

    Техниката се състои от четири етапа:

    1. Първоначално необходимите биоматериали се събират за изследвания (кръв, слюнка и слюнка).
    2. След това пробата се загрява при температура до 98 градуса и не повече от две минути. По този начин, основната форма на генетиката на ДНК е разрушена и се образуват две вериги.
    3. След това идва отгряването или понижаването на температурата, поради което праймерът се свързва с ДНК веригата.
    4. Последният етап се нарича удължение. Това е синтез на молекули, който води до крайния резултат.

    Трябва да прекарате 25-30 такива цикъла, за да получите определен брой копия на ДНК на вирусите. Причинителите на болестта се определят от тях.

    Информационното съдържание и надеждността на PCR диагностиката е 100%.

    Интерпретиране на резултатите от изследването

    Производственото време на анализа е около 5-6 часа.

    Диагностиката по метода на PCR дава 2 варианта на резултатите:

    1. Намерени. В материала, който е изследван, се открива ДНК на туберкулозния агент. Вероятността от инфекция е 97%. Такива пациенти бързо се изпращат в туберкулозен диспансер, където ще се извършва лечение.
    2. Не е открито. Отрицателният отговор показва липсата на причинител.

    Ако резултатът е положителен, лекарят извършва детайлно декодиране, което определя етапа и фокуса на заболяването.

    Фотогалерия

    Особености на PCR за туберкулоза при деца

    PCR се предписва, ако резултатът от теста Манту е несигурен или при най-малко подозрение за инфекция. Осигуряването на процедурата е безопасно за децата.

    Методи за изследване на кръв за туберкулозна PCR

    Причинителят на туберкулозата е микобактерия, наречена туберкулозен бацил или коков бацил. Веднъж попаднали в човешкото тяло, тя може да не се прояви дълго време. Но с течение на времето, веднага щом възникнат благоприятни условия, бактерията може да предизвика белодробна туберкулоза или други органи.

    За успешното борба с това заболяване е много важно да се диагностицира в ранните му стадии. Кръвен тест за туберкулоза чрез PCR е най-ефективният и най-бърз начин за диагностициране на туберкулоза. Това отнема четири часа. Той е по-удобен от други методи, има по-малко противопоказания и почти 100% точност.

    Какво е PCR кръвен тест?

    Днес, PCR анализът е един от най-новите методи за диагностициране на различни заболявания на тялото. За откриване на туберкулоза този метод е най-ефективен в сравнение с други използвани досега методи. Методът е открит през 1983 г. от известния химик К. Муллис, който е получил Нобелова награда за него десет години по-късно.

    В основата на този метод се прилага полимеразна верижна реакция, която позволява да се определи не само наличието на патогена в кръвта, но и неговия външен вид. За тази цел, като се използва PCR метод, се открива част от ДНК на патогена и се извършва неговата идентификация. Дори да има няколко различни патогени в кръвта, тази техника ви позволява да ги откриете всички.

    На пациента се предписва кръвна проба за туберкулоза, когато има съмнение за туберкулозен бацил, но не се открива с други методи.

    Ако желаете, всеки може да премине този анализ самостоятелно, като се свърже с клиниката, където се извършва, например, INVITRO. Тя е една от най-големите частни компании, съдържащи медицински лаборатории в много страни.

    Този метод е ефективен в диагностицирането на туберкулоза?

    Понастоящем няма по-точен анализ за идентифициране на пръчките на Кох в тялото на пациента. Пълната кръвна картина е ефективна, но позволява да се получи положителен или отрицателен резултат само след достатъчно дълго време. За целта изследваният материал се засява върху хранителна среда и едва след няколко седмици става ясно дали бактериите се размножават.

    Методът PCR ви позволява да откриете ДНК на бактериите в рамките на няколко часа, което е голям плюс за диагностициране. В допълнение, анализът позволява точно идентифициране на бактерията, дори ако тя е много малка в кръвта.

    Противопоказания към метода

    Този изследователски метод почти няма противопоказания. Поради факта, че се използва кръв, състоянието на пациента няма значение. Наличието на настинки не засяга резултата от анализа.

    Не се препоръчва да се извършва след ваксинация, както и след последното лечение. Това се дължи на факта, че тялото все още не е почистено, а остатъците от бактерии могат да повлияят на резултата.

    Ползи от анализа

    PCR за кръвен тест за туберкулоза има няколко предимства пред други методи на изследване, като например теста на Манту или рентгеновото изследване. Сред тях са следните качества:

    1. Скоростта на изпълнение. В сравнение с други PCR анализи, направени за няколко часа.
    2. За процедурата можете да използвате не само кръв, но и други биологични секрети на тялото.
    3. Процедурата няма противопоказания, може да се извършва не само за възрастни, но и за деца. Също така е подходящ за бременни жени, без да вреди на тяхното здраве.
    4. Методът позволява откриване на инфекция на кръвта от бактерии в първите етапи, когато няма външни признаци на заболяването.
    5. Техниката позволява да се идентифицира патогенът с най-малки количества бактерии в материала.
    6. Дава добър ефект при изследването на пациента, инфектиран отново.
    7. Анализът може да се направи независимо от това как се чувства пациентът. Например, реакцията на Манту се прави, ако пациентът няма настинки и треска. В този случай няма такива ограничения.

    Както може да се види от предоставения списък, този диагностичен метод е много по-предпочитан от други. Той е напълно безвреден за алергични пациенти. Може успешно да се използва от възрастни и деца. Техниката ви позволява да спестите време за диагностика и да започнете лечението по-бързо.

    Методът е удобен и за хора от провинция, където няма съответни лаборатории. Те не трябва да идват няколко пъти в клиниката, един ден е достатъчно, за да получите резултат от тестове и предписание за лечение от лекар.

    Недостатъци на PCR кръвен тест

    В допълнение към предимствата, този метод има редица недостатъци, които могат да бъдат пречка за извършване на PCR анализ:

    1. Относително високата цена на процедурата. За извършването на такъв анализ се изисква скъпо оборудване, а не всяка клиника може да си го позволи. Той е в големи лаборатории на частни фирми. Цените там, като правило, винаги са високи.
    2. Анализът дава правилния резултат само ако материалът за изследването е избран правилно. Например, при туберкулоза на пикочно-половата система, кръвен тест няма да покаже наличието на болестта. В този случай трябва да съберете урина или отделяне от пикочните органи.
    3. Методът не винаги дава точен резултат при децата. Това се дължи на влиянието на ваксинациите. Например, след ваксинация на БЦЖ този анализ не се препоръчва.
    4. Съществува възможност за получаване на фалшиво-положителен или фалшиво-отрицателен резултат. Какво е това? Методът има много висока чувствителност. При събиране на материала трябва да се спазва повишената стерилност. Ако материалът получи най-малък брой странични бактерии, анализът ще се повреди, резултатът ще бъде изкривен.

    Въпреки недостатъците, методът е широко използван. Например, в случаите, когато е необходимо спешно да се определи заболяването при пациент. Може да се предписва на бременни жени, ако подозират инфекция, която може да застраши бебето или майката. Понякога се предписва на децата преди да се вземе в детската градина. Но това е по искане на родителите.

    Подготовка за процедурата

    Преди да се направи анализ, пациентът трябва да извърши подготвителни дейности. Те зависят от това кой материал ще се предаде:

    1. Ако е необходимо да се дарява кръв, трябва да се приготви стерилна епруветка. Към него се добавя антикоагулантът - специален разтвор, който предотвратява съсирването на кръвта. Събраният материал се поставя в него и се смесва внимателно. Кръвта се събира със спринцовка за еднократна употреба от вена.
    2. Процедурата се провежда сутрин на празен стомах. Кръвта се съхранява в хладилник за не повече от пет часа. Ако игнорирате това правило, резултатите от анализа може да са неточни.
    3. Една седмица преди доставката на биоматериал трябва да спрете приема на каквито и да е медикаменти.
    4. Не можете да дарявате кръв след приема на алкохолни напитки.
    5. При наличие на хронични инфекциозни или възпалителни заболявания, процедурата се отлага, докато човекът се възстанови напълно.

    По време на процедурата е необходимо да се спазва максималната стерилност. Ето защо е важно да се преминат тестове само в доказани клиники под ръководството на опитен специалист. Трябва да се помни, че минималният проникване на чужди микроорганизми може да даде грешен резултат. За да се избегне това, лекарят може да поръча преразглеждане.

    Как се взема кръв от PCR?

    За да дарите кръв за анализ, пациентът не трябва да яде повече от шест часа. Най-добре е да се подложите на процедурата сутрин на празен стомах. Кръвта се взема от кубиталната вена през игла за еднократна употреба веднага в стерилна епруветка. Там се инжектира антикоагулант, така че кръвта да не се съсирва. Смесете съдържанието на епруветката внимателно, като избягвате внезапни движения.

    Ако кръвта е била взета извън лабораторията, тя трябва незабавно да бъде предадена на техника. За изследване за туберкулоза, тя трябва да се съхранява не повече от пет часа. След това време резултатът може да е неточен. Вземането на материали извън лабораторията е разрешено само ако пациентът не може да пристигне в болницата по здравословни причини. Например, той лежи и няма възможност да наеме подходящ транспорт.

    Резултати от декодирането

    Резултатът от PCR може да бъде или положителен, или отрицателен. Позитивно означава наличието на бактерии в организма. Отрицателно означава, че липсва. Въпреки че не винаги е положителен резултат говори за туберкулоза. Може да е погрешно, така че са необходими допълнителни диагностични тестове, за да се потвърди диагнозата.

    Всяка друга информация е трудна за възприятието на пациента и се занимава със специалист. Ако има положителен резултат, лекарят предписва необходимото лечение.

    Разходи за изпитвания в различни центрове

    Цената на процедурата може да варира в зависимост от медицинския център, където се извършва. Вижте таблицата по-долу за подробности.

    Допълнителни Статии За Ларингит